凋亡检测用7-AAD还是用PI好?

samly0

最近做贴壁肿瘤细胞的凋亡检测，原来用BD的PI/ANNEXINV试剂盒，感觉PI比较难清洗干净，容易残留荧光信号，也容易堵机子，看见BD还有个凋亡试剂盒是用7AAD/ANNEXINV组合的，没用过这种组合，不知道用7AAD做凋亡检测跟PI差别大不大，有没有比较过的老师指点一下？

niwanmao

samly0 发表于 2013-3-28 11:58

                               
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用7AAD做的话，是不是不分早期和晚期凋亡的细胞，只有双阳性的细胞呀？

解释上应该是一样的，在ANNEXIN V阳性细胞中，7-AAD阳性的属于晚期凋亡，阴性的属早期。
见下图：

7-AAD和ANNEXIN V

来源：http://bloodjournal.hematologyli ... 012-09-455022-1.pdf

niwanmao

@stef1981 做过，应该差别不大。
http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-1238-2-1.html

feireiro

7-AAD的发射波长在650nm左右，如果Annexin V用FITC标记，那么配合7AAD检测细胞凋亡就不需要做补偿了，还可以加一个PE标记，进行三色实验。

samly0

niwanmao 发表于 2013-3-27 21:37

                               
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@stef1981 做过，应该差别不大。
http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-1238-2-1.html

用7AAD做的话，是不是不分早期和晚期凋亡的细胞，只有双阳性的细胞呀？

samly0

niwanmao 发表于 2013-3-28 12:21

                               
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解释上应该是一样的，在ANNEXIN V阳性细胞中，7-AAD阳性的属于晚期凋亡，阴性的属早期。
见下图：

哦，明白了，谢谢倪老师

samly0

feireiro 发表于 2013-3-28 11:27

                               
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7-AAD的发射波长在650nm左右，如果Annexin V用FITC标记，那么配合7AAD检测细胞凋亡就不需要做补偿了，还可 ...

嗯，谢谢指点