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Caspase-3活性的流式细胞术检测

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发表于 2010-8-1 19:17:11 | 显示全部楼层 |阅读模式

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Caspase家族在介导细胞凋亡的过程中起着非常重要的作用,其中 caspase-3 为关键的执行分子,它在凋亡信号传导的许多途径中发挥功能。Caspase-3正常以酶原(32KD)的形式存在于胞浆中,在凋亡的早期阶段,它被激活,活化的Caspase-3由两个大亚基(17KD)和两个小亚基(12KD)组成,裂解相应的胞浆胞核底物,最终导致细胞凋亡。但在细胞凋亡的晚期和死亡细胞,caspase-3的活性明显下降。
方法:收获细胞正常或凋亡细胞,PBS洗涤,加Ac-DEVD-AMC 37°C反应1h,流式细胞计分析caspase-3阳性细胞数和平均荧光强度。

【2014年1月12日注:由于2010年搬迁服务器时配图丢失,故用另外的caspase-3检测图片代替,用的诱导试剂不同,不过结果差不多】
2014-01-12_200612.gif

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发表于 2014-1-12 17:29:51 | 显示全部楼层
加Ac-DEVD-AMC 37°C反应1h,Ac-DEVD-AMC是什么东西呀,那张流式图看不到,怎么才能看到呀
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 楼主| 发表于 2014-1-12 20:10:42 | 显示全部楼层
pushiming77 发表于 2014-1-12 17:29
加Ac-DEVD-AMC 37°C反应1h,Ac-DEVD-AMC是什么东西呀,那张流式图看不到,怎么才能看到呀 ...

由于2010年搬迁服务器时配图丢失,故用另外的caspase-3检测图片代替了,请查看。

Ac-DEVD-AMC是一种caspase-3的荧光底物。
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