TUNEL法检测细胞凋亡图片示例

niwanmao

标题：TUNEL法检测细胞凋亡图片示例

晚期凋亡的细胞由于DNA的断裂，因而可以出现DNA ladder，从而也就有了经典的检测方法TUNEL。流式也能也能进行Tunel检测，其检测原理与经典Tunel原理基本一致。以BD公司的为例，其利用TdT能将荧光素标记的dUTP标记到断裂的DNA末端，从而使凋亡的细胞具有荧光。但是由于在细胞内标记，细胞需要进行固定处理，操作类似免疫组织化学法，容易造成假阳性。建议采用原装大厂的试剂盒，并且严格的设立对照。经过预实验方法稳定后再进行大规模实验。标本处理后，均可以用荧光纤维镜进行观察，拍照。流式检测后，可以进行精确的计算凋亡百分比。这一点，经典TUNEL是做不到的。

下图是利用dUTP与PI同时标记，图的上方为S期的凋亡细胞，dUTP阳性。

54halley

倪老师 我看不到图

niwanmao

54halley 发表于 2015-12-30 09:29
倪老师 我看不到图

2010年搬迁服务器时丢失了图片，现已补上，并返回流星。谢谢反馈。

vivi主子

老师。请问这个横坐标和纵坐标分别是什么呀？谢谢老师

niwanmao

vivi主子 发表于 2016-9-27 15:01
老师。请问这个横坐标和纵坐标分别是什么呀？谢谢老师

横坐标是PI染色，体现细胞的DNA含量，纵坐标则是TUNEL结果，体现的是DNA断裂情况。如此，可看出哪个周期的凋亡为主。

轩辕河图

niwanmao 发表于 2016-9-27 19:58
横坐标是PI染色，体现细胞的DNA含量，纵坐标则是TUNEL结果，体现的是DNA断裂情况。如此，可看出哪个周期 ...

倪老师，您好。又看了这个idea，想请问一下这两种染料共同处理是有专业的试剂盒子么？还是需要自己分别搭配两种染色处理？不知道有没有相关文献可以参考。

niwanmao

轩辕河图 发表于 2016-9-27 21:18
倪老师，您好。又看了这个idea，想请问一下这两种染料共同处理是有专业的试剂盒子么？还是需要自己分别搭 ...

可以自己搭配。也可以购买现成的，我知道BD有：http://www.bdbiosciences.com/ds/pm/tds/556381.pdf。至于其它公司，也应该会有。

vivi主子

niwanmao 发表于 2016-9-27 19:58
横坐标是PI染色，体现细胞的DNA含量，纵坐标则是TUNEL结果，体现的是DNA断裂情况。如此，可看出哪个周期 ...

谢谢倪老师