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[标本处理] 洗掉未结合抗体的必要性?

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发表于 2013-12-30 14:46:43 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏1流星已解决
有人说抗体跟细胞结合15-30min后需要把未结合的抗体洗掉?抗体没和细胞受体结合上,也能被激发出荧光来?从而影响阳性细胞的准确度吗?还是怎么解释?
BD的annexinV-FITV和PI也需要结合完后再洗一遍吗?

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洗涤很有必要,站内我记得有一个视频,关于流式基础的,可以看一下
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发表于 2013-12-30 14:46:44 来自手机 | 显示全部楼层
洗涤很有必要,站内我记得有一个视频,关于流式基础的,可以看一下
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发表于 2014-2-8 00:49:54 | 显示全部楼层
通常要洗,其实也就是稀释10倍以上。荧光抗体无论是否结合都可以被激发荧光,如果没洗可能增加阴性群的荧光强度。

AnnexinV标记荧光抗体建议洗,也可以不洗,但对照和样本处理要相同。要注意的是AnnexinV的结合依赖钙离子,因此要用AnnexinV Binding buffer洗。
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 楼主| 发表于 2014-2-8 10:25:48 | 显示全部楼层
watson77 发表于 2014-2-8 00:49
通常要洗,其实也就是稀释10倍以上。荧光抗体无论是否结合都可以被激发荧光,如果没洗可能增加阴性群的荧光 ...

好的,明白了
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