MACS 阴性筛选buffy coat中提单核细胞

xlswy1984

请问，有没有人从buffy coat中提取PBMC后，用MACS来分选单核细胞的。
1.想问一下一个LS colum一次最大能应用多少的PBMC，我的是单核细胞阴性选择的 monocyte isolation kitII。可不可以将一个单位buffy coat提出来的PBMC（大约550mio PBMC）一次性的应用在一个LS colum上？
2.还有试剂计量，如果按照说明书上的，一个试剂盒只能做不到2个buffy coat，有没有人有经验，是不是可以少用些试剂呢？
求高手指点一下！

qfzhang

阴选10^9的细胞，用LS，肯定远远超过柱子的性能参数了。

减少磁珠用量，要自己优化孵育时间，磁珠量等。没有成熟可行方案。