细胞凋亡

jingweis530 · 发表于 2014-4-14 11:15:33

请问：当细胞有红色荧光时，因为红色荧光与PI有冲突，怎样用annexin v／PI方法检测凋亡。

niwanmao · 发表于 2014-4-14 13:17:58

可考虑用7-AAD代替PI

jingweis530 · 发表于 2014-4-22 08:30:47

谢谢老师回复！但这个红光对7-AAD 也有干扰时，该怎么办？还有别的染料代替?

chymanhz · 发表于 2014-4-22 08:53:23

这个细胞的红光也是激发出来的吧？知道大致波长吗？

jingweis530 · 发表于 2014-4-22 09:18:52

是因为是细胞用药后自发荧光，所以具体波长不太清楚，但细胞在没有试剂染色前，在仪器上可以在PE和7-AAD的通道上显示有荧光，想试图用其他染料避开这个自发荧光。请老师指教，谢谢！

niwanmao · 发表于 2014-4-22 12:55:38

jingweis530 发表于 2014-04-22 09:18:52

登录/注册后可看大图

是因为是细胞用药后自发荧光，所以具体波长不太清楚，但细胞在没有试剂染色前，在仪器上可以在PE和7-AAD的

应该可以调节自发荧光和7-AAD之间的补偿吧，你试试看

huoguang980789 · 发表于 2014-4-26 11:04:24

ANNEXIN V 一般三种搭配，FITC配PI，PE配7AAD，APC配7AAD，都还需要一个Binding Buffer

桃小丁 · 发表于 2014-9-1 17:04:05

请问楼主最后怎么解决细胞自发荧光的问题？

wynbzxm · 发表于 2014-9-3 15:09:48

看下激发和发射光谱吧

燕仔zoe · 发表于 2014-9-5 16:34:51

本帖最后由燕仔zoe 于 2014-9-5 16:35 编辑

我个人认为，是不是可以这样做。其实相当于三染，7-AAD、PE、自发荧光，然后分别一一调补偿。最有调完补偿后，直接就只有PE\7-AAD的十字门散点图是你最终要的结果。

账号		自动登录	找回密码
密码			加入流式中文网

[标本处理] 细胞凋亡