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中性粒细胞是外周血比例最高的白细胞。这些细胞是第一个出现在炎症和感染部位的,因此是对抗入侵微生物的第一道防线。中性粒细胞具有重要的抗菌功能,如胞吞、释放溶菌酶、产生活性氧。除了这些重要的防御功能,中性粒细胞还执行其他任务以应对感染,如产生促炎细胞因子和抑制细胞凋亡。细胞因子可招募其他类型白细胞参与感染的清除,并抑制中性粒细胞凋亡使其在感染部位生存得更久。这些功能都是在转录水平受到调节的。然而,由于中性粒细胞的寿命是短暂的,所以常规的基因报告方法无法有效研究转录水平的调节机制。
在本视频中,作者提出一种简单而有效的方法,从人外周血中分离纯化中性粒细胞,用受体抗体刺激,分离和免疫标记细胞核,最后通过流式细胞术分析细胞核。通过此方法,成功检测了中性粒细胞和其它类型细胞中NF-κB和Elk-1核因子,从而为这些因子的活化水平监测提供了良好的方法学基础。
视频截图:
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