大鼠的免疫表型分析问题

zark_00

FCM 发表于 2014-6-9 14:55
这两个染料激发光谱重叠了,不能一起使用吧?

我也有这个担心，但之前有些资料里，讲到有10色染之类的，里面也有这两种的合用。所以想找有没有人实际用过的，问问

FCM

zark_00 发表于 2014-6-9 15:27
我也有这个担心，但之前有些资料里，讲到有10色染之类的，里面也有这两种的合用。所以想找有没有人实际用 ...

我觉得是不可以一起用的,发射光谱重叠了(之前写错了,激发光谱是不一样的,一个是488,一个是635),收集的光都在同一个通道,都不是调补偿能解决的问题!不解

FCM

楼主手上有试剂吗?搞个样本做下,试试就知道了

zark_00

哪有试剂啊，还在设计阶段，就是怕买错了，到时候要挨骂呀

niwanmao

FCM 发表于 2014-6-9 15:46
我觉得是不可以一起用的,发射光谱重叠了(之前写错了,激发光谱是不一样的,一个是488,一个是635),收集的光 ...

发射光一样没关系的，因为他们一开始就不是在一条“道路”上走的。

我在一个科研实验中用过这两种染料。
@zark_00  

zark_00

niwanmao 发表于 2014-6-9 20:57
发射光一样没关系的，因为他们一开始就不是在一条“道路”上走的。

我在一个科研实验中用过这两种染料。 ...

非常感谢，再请问下，PerCP 和 APC 会有严重干扰么，在Aria机型488 633配制下。

如果没有，那么 FITC ,PE ,PerCP, PE-Cy7 APC APC-Cy7 这六种能否共用。

FCM

niwanmao 发表于 2014-6-9 20:57
发射光一样没关系的，因为他们一开始就不是在一条“道路”上走的。

我在一个科研实验中用过这两种染料。 ...

哦 ,谢谢指教,学习了

gcz5340

zark_00 发表于 2014-6-9 10:15
再请问下，大鼠的CD45荧光抗体，选IgG3的好，还是选IgM的好，BD官网有这两种 ...

BD和BC好像都有大鼠淋巴细胞检测试剂盒，可以参考一下克隆号单买。

gcz5340

zark_00 发表于 2014-6-10 09:04
非常感谢，再请问下，PerCP 和 APC 会有严重干扰么，在Aria机型488 633配制下。

如果没有，那么 FITC ,PE ...

理论上来说没有问题。很多厂家各根激光器都是一上一下平行关系，收集的时候角度特殊设计，一般各根激光器之间的发射光不会相互干扰。也有像BC的FC500就是双激光共轭设计的，这时候就不能区分PE-Cy7和APC-Cy7。
个人不太喜欢APC-Cy7，荧光比较弱，复合荧光素又容易降解，有时候补偿很难调的好看。