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发表于 2014-9-22 12:51:14
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倪老师,我做了一下预实验。固定和破膜用的是bioscience的foxp3+试剂盒里的试剂:perm/fix、perm buffer
A.perm/fix固定30min, perm buffer洗涤一次,加入含10ug/ml 7AAD的perm buffer 100ul,室温避光孵育30min
C.perm/fix 洗涤了一次,加入含2.5ug/ml 7AAD的FACS buffer 100ul ,室温避光孵育30min
结果如下图,第一个是A, 第二个是C。本来C是整备既不固定也不破膜的,后来不小心加perm/fix洗了一次,7AAD只加了染死-活细胞的量,结果也可以染出类似的图形。两组细胞是一样的,是结肠癌细胞SW480,复苏后过了一晚就做了。CV值不达标,其他还可以。但是图形跟第三个这种图相差有点远啊,不知道是染得不过关,还是细胞本来就这样,倪老师可以帮忙分析一下吗?非常感谢!
A
C
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