密理博的流式平台怎么样？有人使用过么？

椴树

http://blog.milliporechina.com/entry/muse2.html  闲逛看到的millipore的流式细胞仪 我想知道它们的guava微流式细胞分析仪号称一滴血即可分析，并且不是通过鞘液流来进样，一滴血怎么分析呢？不也是要裂解红细胞，染色，离心洗涤么？这么少的细胞量，好操作么？并且细胞少的话有统计学意义么？而且它说因为不是通过鞘液，所以细胞伤害小，我想说，又不是做分选，细胞伤害小对分析来说又没有对分选的意义大。还有它的Amnis成像流式细胞仪 ，不明白多了一项成像功能能给我提供什么帮助，哪位大神来科普下，是不是我没找对点，总感觉有点鸡肋。

niwanmao

没用过。但根据已知的介绍，推测可能是微液流技术：http://www.flowcyto.cn/bbs/forum.php?mod=viewthread&tid=2514

这类技术可能对样本量要求比较小，至于一滴血，则是宣传上的需要，不用这么在意，其意思就是说对样本量要求小。

至于伤害小，可能随口说说的，也没有看到进行科学的对比实验。

不过成像流式细胞仪的成像功能倒是有点用途，其新一代似乎CCD改进不少，所以速度可能好些，它可以将形态和流式结合起来，所以还是有点意思，尤其是对一些未知的信号判断时。

椴树

niwanmao 发表于 2014-12-7 20:28
没用过。但根据已知的介绍，推测可能是微液流技术：http://www.flowcyto.cn/bbs/forum.php?mod=viewthread& ...

我又查了那个 一滴血做流式 它们是这样说的：世界上第一款非依赖高速鞘液流的流式细胞仪。采用划时代的微毛细管专利技术，使得流式细胞仪在历史上第一次摆脱了对鞘液的依赖，实现样本的直接检测，并开创了流式实验的微量样本检测时代。同年，微毛细管技术在美国获得了专利认可。在设计上，精确地运用了毛细管作用的内聚力使细胞流在微毛细管内侧形成稳定的单细胞流排列并依次通过激光检测点。该设计摈弃了鞘液流，使流式细胞仪的应用完全摆脱鞘液消耗。同时，由于检测系统对细胞流内的单细胞进行直接检测，大大降低了对细胞样本量和样本浓度的要求，革命性地实现了对微量样本的细胞分析。 我看他步骤是
实验流程
在96孔板中加入10ul CD8-FITC/CD4-PE/CD3-PECY5 预混试剂，或者根据抗体说明书加入相应体积抗体；
在每孔中加入10ul抗凝全血（约1×105细胞）；
用枪头上下吹打混匀试剂和全血（确保没有血样粘附在孔壁上影响实验结果）；
室温（18-25℃）避光孵育20min；
每孔中加入180ul 1X Lysing Solution或相应体积的裂解试剂；
立即用枪头上下吹打混匀每孔；
室温（18-25℃）避光孵育15min；
尽快用流式细胞仪获取结果（3h内进行检测）
  但是那个加了成像功能的 真的有人需要么？我觉得也只能是一个辅助啊，还是得靠激光共聚焦之类的高分辨啊

niwanmao

椴树 发表于 2014-12-7 22:25
我又查了那个 一滴血做流式 它们是这样说的：世界上第一款非依赖高速鞘液流的流式细胞仪。采用划时代的微 ...

免洗方法对于科研标本没有问题，但在临床上行不通。
所以，这款仪器对于科研标本还是有点特色的，microfluidics技术还是有点意思的，不过具体效果如何，需要使用后才知道。

至于成像功能，怎么说的，有点时候还是有用的，当然，激光共聚焦肯定是更清晰、分辨率更高，但是这个成像功能相当于把流式散点图上的一个个点与一个个图像对应起来，这样就把细胞形态和相对应的表型一一对应了，这个激光共聚焦就实现不了。
所以他们之间还是各有优劣的。

HGYFGCTDTDTF

挺好的，我们用的就是这款仪器，倪老师的看法应该是正确的！