临床9色和10色流式细胞术（一）：为什么需要这么多颜色？

niwanmao

流式中文网注：不得不承认，国内的流式远远落后国外，在10年前（2005年）Brent Wood撰写这篇9色和10色流式文章时，我们还在为4色洋洋得意。接下来，流式中文网会分几次将这篇high level多色流式翻译并介绍给大家共同学习，一起将临床流式早日推向10色时代，缩短与国外的差距。（Brent Wood. 9-Color and 10-Color Flow Cytometry in the Clinical Laboratory.Arch Pathol Lab Med—Vol 130, May 2006）

临床流式细胞术实验室现在开始越来越多的处理少量样本，例如细针穿刺或体液，这些标本的细胞都很少，对分析限制很大。而且，要分析疾病持续状态或复发时少量的异常细胞，需要以高度重复性和特异性检测分析大量细胞。此外，很多临床实验室在标本量增加的同时，还需要尽可能减少人员和试剂消耗，即提高效率。以上所有的问题，都是需要比3色、4色更多颜色的多色流式细胞术来解决。

我们为什么需要这么多颜色？我们从以下五个方面逐一阐述：

1、增加细胞群体区分的准确性
抗体数量的增加，使得流式数据中的信息维度增加，这就为我们从一个复杂群体中特异性区分出任何单个事件提供了可能。同时，信息维度的增加，使得我们更容易鉴别出微量的异常细胞群，即灵敏度也得到了提高。这两方面在微量异常细胞群检测中尤其重要（例如微小残留病灶检测）。

2、更充分地利用少量样本
从少量的临床样本中获取到尽可能多的信息，需要避免不必要的消耗，更多的抗体做到一管，可以充分利用本来就珍贵的少量样本。这些样本包括脑脊液、细针穿刺标本等。此外，多色还可以使得诊断效率更高、信息更完整。

3、处理的管数更少
单管中抗体数量的增加，可以使我们处理的管数更少，减少样本量，还可以减少仪器获取时间、标本处理时间等。还有，每管中抗体量的增加，使得不同管之间需要重复用的设门抗体节省下来，长此以往，是一笔不少的开支。

4、获取的事件数更多、效率更高
由于管数的减少，少量的样本也能获取到大量事件。这很重要，尤其是在微小残留病灶检测和一些微量样本。

5、标准化
现在争论诊断某种白血病、淋巴瘤最好的3色或4色组合是什么已经没有什么意义了，随着9色、10色的流式应用，每管可以包含更多的抗体，从而更容易实现标准化。

不过，目前来说，高级多色流式细胞术的缺点就是仪器贵、需要一些较贵的染料（故费用较高）、需要更多的技术方面经验、数据分析更复杂。但随着技术的成熟和应用范围的拓宽，费用方面肯定会降下来，而技术方面接下来的连载会讨论。

wfz

科学技术就是生产力