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楼主: chymanhz

[干细胞相关] MSC数据中CD14和CD34呈弱阳性,求解

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发表于 2023-12-4 23:50:01 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2023-12-4 20:22
咦,这是8年前的帖子,看到你的回复,我想了又想,已经想不起当初的思维了。

如果换成现在去回答,我会考 ...

倪老师,方案中做的是单染,像CD34,CD45都是用的PE染料,CD45是阴性的,cd34有25%左右的阳性,用量是5ul,那对于CD34,如果做个抗体滴定,减少抗体用量,会有改善吗?
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发表于 2023-12-5 09:10:46 | 显示全部楼层
wmj123456 发表于 2023-12-4 23:50
倪老师,方案中做的是单染,像CD34,CD45都是用的PE染料,CD45是阴性的,cd34有25%左右的阳性,用量是5ul ...

蛮难说,因为这里14和34两个抗体都这样子,可能更多的还是本底强

但是滴定无论什么情况,都还是很重要的
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发表于 2024-10-11 23:54:08 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2023-12-5 09:10
蛮难说,因为这里14和34两个抗体都这样子,可能更多的还是本底强

但是滴定无论什么情况,都还是很重要的 ...

倪老师,我最近做了个msc鉴定,分别是CD73和HLA-DR的单染,用的空白对照设门的,抗体没有进行滴定。结果是,利用空白管设门,CD73阳性比例是94,HLA-DR阳性比例是2.55,这个比例正好在临界范围内,不太清楚这个MSC到底纯不纯?还有,由于还没买同型对照,直接用的空白设门,这个到底合理不合理
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发表于 2024-10-12 08:10:59 | 显示全部楼层
wmj123456 发表于 2024-10-11 23:54
倪老师,我最近做了个msc鉴定,分别是CD73和HLA-DR的单染,用的空白对照设门的,抗体没有进行滴定。结果 ...

用空白对照设门,一般是会比例偏高的,但看起来应该问题不大,只是CD71阳性率偏低了点

MSC的检测,BD那个试剂盒其实挺好的,有阴性和阳性内参
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发表于 2024-10-12 09:24:25 | 显示全部楼层
wmj123456 发表于 2024-10-11 23:54
倪老师,我最近做了个msc鉴定,分别是CD73和HLA-DR的单染,用的空白对照设门的,抗体没有进行滴定。结果 ...

你要换成同型对照,你的阳性比例只会更低,不会比你现在这个高
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发表于 2024-10-12 09:40:52 | 显示全部楼层
范晋波 发表于 2024-10-12 09:24
你要换成同型对照,你的阳性比例只会更低,不会比你现在这个高

是的啊,那所以是用空白对照设门,其实也不会差异很大了,那这个实验再重复看看吧?前辈有哪些好的建议?
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发表于 2024-10-12 09:58:42 | 显示全部楼层
wmj123456 发表于 2024-10-12 09:40
是的啊,那所以是用空白对照设门,其实也不会差异很大了,那这个实验再重复看看吧?前辈有哪些好的建议? ...

用的抗体是谁家的,建议还是要做抗体滴定,增加抗体用量,94%已经已经超过标准了
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发表于 2024-10-12 10:01:48 | 显示全部楼层
wmj123456 发表于 2024-10-12 09:40
是的啊,那所以是用空白对照设门,其实也不会差异很大了,那这个实验再重复看看吧?前辈有哪些好的建议? ...

用空白对照就可以,调好补偿,做好抗体滴定,一般MSC检测样本浓度都不太高,抗体丰度太高,阴性指标的荧光强度是会升高的,这个一般不会太高,还有一定最少洗一遍,我有遇到直接检测阴性指标特别高,洗了一遍就正常了。
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