流式抗体在室温下放置一晚还能不能用

goddoor · 发表于 2015-7-31 12:00:35

如题，购买的EB公司的测人Treg细胞和Th17细胞的流式抗体及配套的EB的Fix/Per工作液，染色和破膜buffer，CD4/CD25是混合剂，荧光对应分别是FITC及APC，IL-17A是APC，FOXP3-PE，之前一直都染得很稳定。天杀的实验室前天晚上跳闸了，所有的冰箱全部断电，大概停了24小时，早晨重新连上电源显示温度是25℃，赶紧去测了几个样本，发现CD4对应的FITC染得很好，但是APC和PE都出不来了，大家以前有没有遇到过这种问题，是不是流式抗体室温放一晚就不能用了？急啊！

Arcrain · 发表于 2015-7-31 12:49:57

主要看抗体稳定性（高温、低温、酸碱高低PH、离子强度等等），不同抗体差别很大，这个不能一概而论。诊断抗体、抗体药物、流式抗体等等对抗体各方面特性的要求都是不同的，非常复杂。搞出个能结合的抗体容易，搞成能用的抗体就是另外一回事了。

zhang4083 · 发表于 2015-7-31 14:00:53

问题不大

niwanmao · 发表于 2015-7-31 15:17:00

一般相对来说，温度对串联染料影响偏大，但普通染料影响不大。避光反而更重要。

小憨 · 发表于 2015-8-2 09:44:03

本帖最后由小憨于 2015-8-2 09:45 编辑

问题不大，抗体分子稳定，主要是荧光素，你选的这几个荧光素也比较稳定的。染管补偿微球看看，上机一跑就知道了。

goddoor · 发表于 2015-8-2 22:53:46

谢谢大家的回复，后来又去测了一次能测出来，之前测不出来是因为流式机器有个荧光通道坏了

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