血液样本淋巴细胞圈门

EthanMr · 发表于 2015-8-3 12:59:47

本帖最后由 EthanMr 于 2015-8-3 13:03 编辑

检测血液样本T细胞时，不知道哪一群是淋巴细胞，请各位老师帮忙看一下，非常感谢！
1. 样本为肝癌病人血液样本，裂红后（不确定是否分离出PBMC），-80度冻存，空运到实验室，复苏培养24小时后标记抗体。
2. 同时标记四个抗体（BD公司）：CD3-APC、CD8-PerCP、CD4-PE、CD25-FITC。
3. 实验目的：检测T细CD25的表达情况。
4. 流式上样收集10万细胞。
5. 问题：FSC/SSC散点图中哪一群是淋巴细胞？上图为FSC/SSC低电压下收集的样本；下图为FSC/SSC高电压下收集的样本。
注：附件为原始数据低电压收集的样本和高电压收集的样本，包含未染色组（Blank）、和染色组(Sample)。

Low voltage

低电压

High voltage

高电压

低电压.rar (3.25 MB, 下载次数: 9)

高电压.rar (3.25 MB, 下载次数: 1)

niwanmao · 发表于 2015-8-3 12:59:48

这种图形一般都是因为标本状态不佳、细胞活力差造成的，含大量碎片。下载了你的低电压文件，反设门（如下图），很明显，E2区域才是正常淋巴细胞区域，E2左侧的所谓信号都是非特异性染色。

EthanMr · 发表于 2015-8-4 10:49:07

明白了，非常感谢倪老师的解答~~

zjyyuanyuan666 · 发表于 2024-9-23 10:35:23

老师您好，我也是这种情况，请问这样根据CD3反圈淋巴细胞是对的吗？

范晋波 · 发表于 2024-9-24 16:57:43

咱就说，方案里加个CD45就很容易解决的事情，这么复杂的样本，就是不加CD45,到底谁给你设计的方案？这种粗略圈淋巴，没有去死细胞，没有去黏连，这出来的数据能准吗？

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