PE-CY5染色问题

宅在火星

请问各位一个PE-CY5染色问题，我们培养的T细胞，用CD62L-PE CY5染单阳管，调补偿的时与第三通道的补偿怎么也调不好，单峰图也显示没有峰，请问大家有没有遇到过这种情况，我们实验室其他流式抗体，只要是PE-CY5的都有调补偿调不好的问题，但是机器质控都没有问题，请教大家这是怎么回事？谢谢~

sunzheng_99

pe-cy5    也是FL-3

宅在火星

呃，捉急，写错了，是和第四通道，补偿调不好

小憨

宅在火星 发表于 2015-8-5 12:54
呃，捉急，写错了，是和第四通道，补偿调不好

是和APC通道的补偿是吗？反正APC和PE/Cy5最好别一起用，补偿太大了，换PerCP/Cy5.5吧

niwanmao

这似乎不是补偿调不好的问题了，感觉太怪了，补偿调不好也不是这样的图形啊。S形的

宅在火星

是PE-CY5和APC通道的补偿，买的时候没意识到它俩太相近了，结果补偿怎么也调不好，跑成这样也太奇怪了，而且单峰图也是“趴”成一片，根本没有峰，有没有试剂和机器的问题？我们是BD Calibur的

niwanmao

宅在火星 发表于 2015-8-5 16:29
是PE-CY5和APC通道的补偿，买的时候没意识到它俩太相近了，结果补偿怎么也调不好，跑成这样也太奇怪了，而 ...

我知道是calibur，即使两者因为荧光光谱重叠，需要增加很大的补偿似乎也不会造成这种歪七扭八的形状，你这里是调节了多大的补偿？

宅在火星

niwanmao 发表于 2015-8-5 19:59
我知道是calibur，即使两者因为荧光光谱重叠，需要增加很大的补偿似乎也不会造成这种歪七扭八的形状，你 ...

补偿从0~99%，几乎没有什么太大变化

niwanmao

宅在火星 发表于 2015-8-6 12:21
补偿从0~99%，几乎没有什么太大变化

如果调节补偿没有变化，那么更加肯定不是补偿问题了，而是一些异常的电子信号，结果不对的。不知道你这群R1的比例多少？FSC和SSC比平时其它情况下有没有变动很大？