细胞周期不能成峰，求帮助！

linyiljj

各位大神：
LZ流式新手。
最近做细胞周期，用药物作用鼻咽癌细胞48小时后，收集细胞。乙醇固定。基本是按网上和试剂说明书操作，RNA酶37度水浴30分钟，PI染色一小时内上机。我的阴性对照组能够有很好的曲线，G1，S，G2分明。可是药物作用组不能成峰，G1，S，G2都是重叠的，不能分开。敢问这是为什么呢？有什么解决办法吗？流式上机的那边老师说这个数据没有意义就不发给我了。所以我也没有图。希望各位大神给予宝贵的意见。我实验重复了4次了，试剂也换过，都是一样的效果，迷茫中~

niwanmao

可以看看FSC/SSC，是不是都成了碎片了？因为你现在没有图也无法确定原因，如果对照组和实验组的染色步骤一样，那么可能还是细胞的问题，可能细胞都碎了。

linyiljj

细胞是有许多碎片，但是并不会都碎了~我用药物作用24小时还可以做出来，但是作用48小时就不行。24小时趋势不明显。所以现在都没有合适的结果。求帮助~

linyiljj

感觉和药物还是有关系，不知道有什么办法不？

niwanmao

linyiljj 发表于 2015-9-29 23:30
细胞是有许多碎片，但是并不会都碎了~我用药物作用24小时还可以做出来，但是作用48小时就不行。24小时趋势 ...

如果分不开，说明细胞都死光了。建议还是：
1、减少药物剂量；
2、减少作用时间。
如果确实没有趋势，你就需要考虑当初的设想是否正确，需要换一条路做，例如自噬。