CD38,CD45双染的Annexin V-PE,7AAD凋亡该如何调补偿

helinyan

大家好，目前抗体如下，FITC-CD38, APC-CD45, Annexin v-pe, 7AAD,
我要调补偿的话如下方案可以吗：
1、提前用PBS配成的70%乙醇固定24h，获得死细胞
2、调补偿的样本准备如下：
    （1） 50%活细胞+50%死细胞，不加抗体，作为阴性对照；
    （2）50%活细胞+50%死细胞，加入FITC-CD38；
    （3）50%活细胞+50%死细胞，加入APC-CD45；
    （4）50%活细胞+50%死细胞，加入Annexin v-pe；
    （5）50%活细胞+50%死细胞，加入7AAD。
求助大家这个调补偿的方案是否可行呢？
然后（1）（2）（3）管中的缓冲液用什么，用PBS还是凋亡试剂盒里的buffer？

niwanmao

没有必要这么复杂，呵呵。

你用药物诱导凋亡的细胞就可以用来作为调节补偿的对照了，一管即可。