流式图是不是有问题

Kimbryant · 发表于 2015-10-17 22:54:59

本帖最后由 Kimbryant 于 2015-10-19 08:55 编辑

倪老师，这个是我想做CD4+CD25+CD127-的流式图？请问是不是电压调的太低了？

chymanhz · 发表于 2015-10-18 08:48:46

哭了。下载你的文件还收2流星，答对了才给1颗{:soso_e127:}

Kimbryant · 发表于 2015-10-18 13:21:07

不好意思，已改

家的感觉 · 发表于 2015-10-19 08:51:22

Kimbryant 发表于 2015-10-18 13:21
不好意思，已改

还是没改吧，呵呵

mxc0712 · 发表于 2015-10-19 10:54:10

楼主标本放了多久染色上机的？感觉FSC-SSC看着细胞形态就不太好了，CD4的补偿感觉没调好，CD25和CD127还不太会看...也是初学流式，不过做的是FoxP3标Tregs，共同探讨学习{:soso_e113:}

Kimbryant · 发表于 2015-10-19 11:20:40

mxc0712 发表于 2015-10-19 10:54
楼主标本放了多久染色上机的？感觉FSC-SSC看着细胞形态就不太好了，CD4的补偿感觉没调好，CD25和CD127还不 ...

是用PHA刺激活化CD4+细胞，跟肿瘤细胞共培养3天后做的

mxc0712 · 发表于 2015-10-19 11:29:53

Kimbryant 发表于 2015-10-19 11:20
是用PHA刺激活化CD4+细胞，跟肿瘤细胞共培养3天后做的

我的是外周血处理了直接上机检测，没有刺激培养，感觉坏死细胞碎片会有影响吧...还是个菜鸟，还是听听其他有经验老师的见解吧，见笑了

niwanmao · 发表于 2015-10-19 13:43:59

mxc0712 发表于 2015-10-19 11:29
我的是外周血处理了直接上机检测，没有刺激培养，感觉坏死细胞碎片会有影响吧...还是个菜鸟，还是听听其他 ...

我大致看了下，发现确实死细胞很多。其实对于免疫细胞检测，还是强烈建议加入细胞死活鉴别染料，可以获得更纯粹和更准确的结果。
至于CD4，感觉分群分不开，如果没有刺激过的话，那很可能跟抗体有关，抗体的使用量或抗体效价。

小宁 · 发表于 2015-11-5 13:03:07

niwanmao 发表于 2015-10-19 13:43
我大致看了下，发现确实死细胞很多。其实对于免疫细胞检测，还是强烈建议加入细胞死活鉴别染料，可以获 ...

老师你好菜鸟提个问题在这幅图里如何看死细胞啊

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