火箭峰调补偿

weide12 · 发表于 2015-10-20 13:46:26

肝脏分离的巨噬细胞，抗体标记了FITC，PE ，PE-Cy7和APC，FITC单标管用FITC和PE为坐标显示时为火箭峰，这样的图怎么调补偿？谢谢大家了。

niwanmao · 发表于 2015-10-20 17:51:09

你的FSC/SSC散点图怎么设门？巨噬细胞应该F4/80比较高的吧，为什么都是阴性的？

weide12 · 发表于 2015-10-20 20:51:37

图p1为当时分选时的P1门，图p1-1为2天后分析仪上的p1门

weide12 · 发表于 2015-10-20 20:57:12

F4/80 sort和test分别为两次实验同一样品的F4/80 FITC图

weide12 · 发表于 2015-10-20 21:02:19

两张图是两次实验中FITC和PE的图，同一样本用多聚甲醛固定2天后在分析仪上测就没有分群了

weide12 · 发表于 2015-10-20 21:32:12

实验中是否可以以所有细胞为门圈CD45阳性的，然后以CD45再继续圈门？我现在有时不标CD45，而是像上图圈出一级门后，用F4/80和CD11b分群。如果有CD45了是不是不用圈P1门了？

facetodog · 发表于 2015-10-27 23:15:20

貌似补偿根本木有调节

a86856635 · 发表于 2015-11-3 10:07:52

F4/80在巨噬细胞上称非连续表达的，巨噬细胞活化后才表达，而且表达比较弱，我曾经试过F4/80用别的染料都比FITC染的好。CD45是淋巴细胞共有抗原，表达是非常强的，你却用了PE的染料。
http://www.researchgate.net/post/F480

子墨羽飞 · 发表于 2015-12-4 12:10:31

a86856635 发表于 2015-11-3 10:07
F4/80在巨噬细胞上称非连续表达的，巨噬细胞活化后才表达，而且表达比较弱，我曾经试过F4/80用别的染料都比 ...

你好，非连续表达是什么意思呢？

niwanmao · 发表于 2015-12-4 20:15:32

子墨羽飞发表于 2015-12-4 12:10
你好，非连续表达是什么意思呢？

可能是笔误吧，应该是连续表达吧：
red pulp macrophages (F4/80++CD11b+ highly autofluorescent),
marginal zone macrophages (CD209b+F4/80-)
marginal zone metallophillic macrophages (CD169+F4/80-)
monocytes and monocyte-derived macrophages (F4/80+CD11b+)

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