同型对照表达过高，请求指导，谢谢大家了

五月玫瑰

同型对照表达过高，请求指导，谢谢大家了。  上篇帖子存成了草稿，也不知道发出去没。 再发个。。
http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-4759-1-1.html

流星

最近在检测一种胞内蛋白 ， 细胞是由单核细胞诱导出来的 。FITC染色直接标记法。查阅文献得知其表达率至少在80%以上。但是我实验做出来最多 也就40%。我贴了一些图。有一些问题想请教下大家。 我们流式是BD C61.我收集的是一群细胞 但是不知道是什么原因 同型对照组或阳性组有时会出现两群细胞。   2. 同型对照的使用浓度是否一定要和标记抗体一致。我降到了其0.5倍。但是与未染色比，阳性仍很高，是否还需要降低呢。 3.咨询厂家回复说 可能是未封闭的原因，我的抗体是兔多克隆抗体。 我是否可以用索来宝封闭血清就可以了，兔的。 4. P4 门中细胞也分了两块，是什么原因啊。 谢谢啦。

niwanmao

那个帖子存成草稿我们是看不到的，建议你把那个帖子内的内容复制到这里。

五月玫瑰

niwanmao 发表于 2015-11-5 15:07
那个帖子存成草稿我们是看不到的，建议你把那个帖子内的内容复制到这里。 ...

好的啊。。。。。。谢谢

niwanmao

这个现象其实没法直接从图上就判断的出来，建议根据http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-4181-1-1.html中的原因逐一排除，首先要确保你选择的同型是正确的，同型的选择要求同一公司、同样浓度、同一亚型、同一物种。