流式检测病毒滴度

小宁

大家好 我刚开始做流式 有许多问题想请教各位大神  我用空的293T细胞上流式的结果为"空293T-1/2"   加病毒的293T上流式的结果为"加病毒的293T-1/2"   
问题一：我想问都是293T细胞  我之前都把各参数摸索的还可以  可是为什么用相同的参数我的兔惠城那样 求解释
问题二：我的目的是测病毒的滴度  滴度=阳性率X细胞数/病毒体积，其中细胞数应该是感染时的细胞数还是上流式前的细胞数  我测得是慢病毒的滴度
问题三：公式中的阳性率应该选择直方图中的阳性率 还是用带有梯形门的阳性率  为什么  
麻烦各位   我刚开始接触  难免问题低级  望大家勉强看 并给予解释

niwanmao

1、第一个问题看不懂什么意思，什么是兔惠城？
2、细胞数应该是上机前的细胞数和体积，你这样已经有点类似于绝对计数了，建议可以考虑加入绝对计数微球。
3、梯形门更好。

小宁

niwanmao 发表于 2015-12-10 20:30
1、第一个问题看不懂什么意思，什么是兔惠城？
2、细胞数应该是上机前的细胞数和体积，你这样已经有点类似 ...

打错了  应该是我用相同的参数进行实验组（即加入病毒的感染组）上机   可是跑出来的FS/SS中的293T细胞主群是那样（图3：加病毒的293T-1）   这样的FS/SS，我后面的梯子型的百分比可信吗

niwanmao

小宁 发表于 2015-12-11 08:59
打错了  应该是我用相同的参数进行实验组（即加入病毒的感染组）上机   可是跑出来的FS/SS中的293T细胞主 ...

图3的FSC/SSC应该把右边FSC增大的细胞都圈进去。

小宁

niwanmao 发表于 2015-12-11 09:17
图3的FSC/SSC应该把右边FSC增大的细胞都圈进去。

我用空细胞已经确定了门的大小及FS和SS的参数  在上实验组的时候还可以在改动吗  不是应该用之前的所有应用吗

niwanmao

小宁 发表于 2015-12-11 09:53
我用空细胞已经确定了门的大小及FS和SS的参数  在上实验组的时候还可以在改动吗  不是应该用之前的所有应 ...

你处理的措施对细胞大小和形态有改变，你的门就应该变，这是灵活的原则，并非死板的。