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[结构和原理] 关于流式对照阴性部分的界定

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发表于 2015-12-15 15:23:11 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏1流星未解决
倪老师及各位站友:
有个小问题想请教一下,我做流式的时候设定了isotype对照,但是问题来了,阴性部分到底应该低于多少呢?还是根据等高线图直接在边缘设门?关于这个问题有没有一个约定俗成的规矩呢?
还有,像这类的小问题在哪可以找到比较全的资料参考呢?

谢谢各位

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发表于 2015-12-15 20:20:57 | 显示全部楼层
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发表于 2015-12-16 08:24:35 | 显示全部楼层
看了倪老师推荐的帖子受益匪浅,也有些小经验能抛砖引玉,跟大家分享一下~ 我觉得设门就跟做统计检验一样,看你把检验水准设到多少了,可以是5%,也可以是1%,也可以是0.1%,但一般不会超过5%。流式的设门其实就是设定置信区间,一般我们都以95%作为置信区间的标准,对应在流式图上,落在峰两侧95%的细胞是来自同一个群体;而两侧各2.5%的细胞是来自另一个群体,是不正常的。你也可以把置信区间的范围画更大,比如99%置信区间;当然,我们在做阴性对照的时候根本不加抗体,人为保证了这些细胞肯定是没有结合抗体的,所以置信区间也可以是100%;做iso对照时,可能会有少部分非特异结合,所以可以把置信区间缩小一点,个人觉得95%是可以接受的。
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 楼主| 发表于 2015-12-20 19:53:59 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2015-12-15 20:20
其实以前都讨论过很多次的:
http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-4533-1-1.html
http://www.flowcyto.cn/bb ...

感谢倪老师提供的重要信息,受益匪浅
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 楼主| 发表于 2015-12-20 19:57:14 | 显示全部楼层
小憨 发表于 2015-12-16 08:24
看了倪老师推荐的帖子受益匪浅,也有些小经验能抛砖引玉,跟大家分享一下~ 我觉得设门就跟做统计检验一样, ...

这见解倒是很独到,不过确实很有道理,点赞
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