在文献中看到的操作一般如下：
1. isolate PBMC from blood
2.enrich monocytes by PBMC adhere plate
3.add GM-CSF and IL-4 for 3-7 days
我的问题主要是集中在第2和3点上。
1. 如何富集？
我用过fresh和冻存的PBMC，然后放在6孔板上进行2h或是过夜静置，但是没有太多的monocytes贴壁。
一般有人说是PBMC的10%是monocytes。我做过计算，贴壁的数量极少，变异极大。
想问下，做这个实验，最好用哪个牌子的平板？
在进行富集的操作，静置和用PBS冲洗的操作？
贴壁的PBMC到底有多少？
2.我尝试过先分行出CD14阳性的细胞，然后再加GM-CSF培养，3到7天后，细胞整体仍没有多少贴壁的。
3.我在后期的实验操作中，要求细胞贴壁比较好。
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发表于 2015-12-17 19:43:41
发表于 2015-12-17 20:33:52