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[结构和原理] 两种细胞分别表达两种受体,还需要调补偿吗?

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发表于 2016-1-29 10:17:16 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏1流星未解决
我要测的两种受体分别染FITC和PE,这两种受体分别在两种细胞上表达(待测标本是混合细胞),这种情况还需要调补偿吗?我的理解是,因为流式一次只检测一个细胞的荧光,虽然FITC和PE会有干扰,但如果一个细胞只表达一种受体,另外那个荧光就不会干扰它,就可以不调补偿。我的理解对吗?谢谢!

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发表于 2016-1-29 14:43:58 | 显示全部楼层
需要。
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 楼主| 发表于 2016-1-29 16:04:17 | 显示全部楼层

为什么?是因为自发荧光会产生干扰吗?
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发表于 2016-1-29 16:52:20 | 显示全部楼层
vivic5015 发表于 2016-1-29 16:04
为什么?是因为自发荧光会产生干扰吗?

只要荧光素在同一个地方发光,通过同一条光路检测,就存在荧光补偿。
这么解释吧,以手电筒发出扇形的光做比喻,你的例子就类似于你拿一个手电筒,我拿一个手电筒,当我们站在一个地方时,朝着同一个方向照射,肯定存在重叠,但如果你在北京,我在杭州,那发出的光肯定没干扰。
所以你这里同样的道理,因为两种受体尽管是分布在两种细胞上,但是两种细胞在同一个标本里面,而且通过同一个发光点和同一条光路,所以还是存在补偿,除非你换成FITC和APC就可以无需补偿。
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