没做单染管时，flowjo可以对一个sample调节补偿吗？

lisa-apple

请教倪老师和各位战友，如图，用的calibur测的，当时可能补偿没调，现在可以用flowjo调节这一个sample Percp-cy5.5和PE之间的补偿吗？做的时候没有做单染管。。。。。。


另外，还想再问一下：我收集的人外周血标本，想先收集一批再一起测表型，是直接冻存全血标本再复苏提PBMC，还是冻存PBMC比较好呢？
谢谢~

niwanmao

Calibur保存的是FCS2.0格式，貌似有点麻烦，可以试试看。

可以冻存PBMC一起测，很多protocol里面都是这么做的。但当然最好的是现收现做。

lisa-apple

niwanmao 发表于 2016-2-29 08:24
Calibur保存的是FCS2.0格式，貌似有点麻烦，可以试试看。

可以冻存PBMC一起测，很多protocol里面都是这么 ...

倪老师，那用flowjo怎么调呢？有这方面的教程吗？我看的说明书里是教根据单染管自动调的补偿。
还有，之前看某个回复的帖子上说建议冻存全血，具体帖子我找不到了，所以想再问您一下。我现在做实验大部分都是用的冻存的PBMC，如果能直接冻存全血，会更方便呢

niwanmao

lisa-apple 发表于 2016-2-29 09:21
倪老师，那用flowjo怎么调呢？有这方面的教程吗？我看的说明书里是教根据单染管自动调的补偿。
还有，之前 ...

所以说人要不断学习，我现在回头看这个几年前的回帖，因为那时候没看过相关的protocol
，所以就下了这个结论，但后来发现那些《多色流式优化方案》系列protocol都是冻存PBMC：http://www.flowcyto.cn/bbs/forum ... ion=view&ctid=6。所以，我就改正错误了。对此造成的误导表示抱歉。

调节补偿，需要根据单染管调节，Calibur不支持自动调补偿，flowjo可以自动计算，但我觉得还是手工调节更方便。

lisa-apple

niwanmao 发表于 2016-2-29 14:39
所以说人要不断学习，我现在回头看这个几年前的回帖，因为那时候没看过相关的protocol
，所以就下了这个 ...

哦，谢谢倪老师，我自己也再做一下预实验对比一下。