pma/ionomycin对小鼠脾脏CD3表达有影响吗？

sch658 · 发表于 2016-4-18 20:39:17

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做小鼠脾脏淋巴细胞增殖实验发现pma/ionomycin刺激48小时后，增殖的细胞CD3不表达，请问这是为什么？

Victorrwang · 发表于 2016-5-17 13:32:18

chenry 发表于 2016-5-17 09:05
好主意，非常感谢！目前感觉这个PMA和ION刺激T细胞活化和antiCD3/CD28刺激T细胞增殖还是有些区别的。PMA和I ...

那是有区别的.后者更接近与自然生理环境
激活2小时应该就有细胞集落产生了吧。

Victorrwang · 发表于 2016-5-16 16:55:53

chenry 发表于 2016-5-16 13:15
据说PMA/ION会下调T细胞表面抗原CD4，这种现象在mouse中不是很明显，但是在human中很明显，但是仍能明显 ...

我cyTOF的data来看的话，已经到了无法分群的地步了。但通常流式的信号会更明显。建议你先试一下。不行的话可以先染cd4，再进行激活。

Victorrwang · 发表于 2016-5-3 23:45:48

通常来说，cd3受影响的概率不大，虽然有人也报道过。相反，CD4,8 以及一些chemokine receptors的表达量会大大下降。
楼主的问题是 pma／ionomycin激活一般只做3-6小时。没听说做过超过12小时的。
如果主要看t 细胞增殖，加cd3就可以

niwanmao · 发表于 2016-4-18 20:43:57

应该不会，需排除染色和抗体问题。

chenry · 发表于 2016-5-16 13:15:01

Victorrwang 发表于 2016-5-3 23:45
通常来说，cd3受影响的概率不大，虽然有人也报道过。相反，CD4,8 以及一些chemokine receptors的表达量会大 ...

据说PMA/ION会下调T细胞表面抗原CD4，这种现象在mouse中不是很明显，但是在human中很明显，但是仍能明显分群，请问您有做过吗？我最近在做ICS，但是不想反设门，如果不影响分析，准备直接标记CD4了。

chenry · 发表于 2016-5-17 09:05:48

好主意，非常感谢！目前感觉这个PMA和ION刺激T细胞活化和antiCD3/CD28刺激T细胞增殖还是有些区别的。PMA和ION刺激后4~6小时内在视野中基本上看不到玫瑰花环结构。

xueer5168 · 发表于 2019-7-9 14:57:22

……我的PMA/ION刺激后，PBMC CD19marker几乎不可见，CD4表达显著下调。

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