同型对照和封闭剂的选择问题？

120971944

封闭剂和同型抗体怎么选择，两则目的不都是去掉抗体的非特异性结合吗

即使细胞的非特异性结合很高，那用同型抗体不是也可以测出正确的结果吗，非要用封闭剂吗？

niwanmao

两者的概念要分清。
Fc-Block是防止由于Fc受体片段非特异性结合导致的非特异性信号，而同型对照没有法防止这些信号出现，只是给你一个体现对应抗体背景结合的参考。

angelina8709

niwanmao 发表于 2016-6-22 21:30
两者的概念要分清。
Fc-Block是防止由于Fc受体片段非特异性结合导致的非特异性信号，而同型对照没有法防止 ...

倪老师：
小鼠脾脏细胞+ Goat anti Rat IgG Fc PE 抗体，有很强的阳性峰，是不是说明 细胞上Fc受体有非常强的特异性结合，有什么可以代替Fc bloker来阻止非特异性结合啊，

niwanmao

angelina8709 发表于 2016-6-23 11:05
倪老师：
小鼠脾脏细胞+ Goat anti Rat IgG Fc PE 抗体，有很强的阳性峰，是不是说明 细胞上Fc受体有非常 ...

我们人的细胞染色用10%正常人血清，小鼠大多用Fc Blocker，实在不想买，你试试小鼠血清看看，不知道效果如何，我也没做过。

120971944

niwanmao 发表于 2016-6-22 21:30
两者的概念要分清。
Fc-Block是防止由于Fc受体片段非特异性结合导致的非特异性信号，而同型对照没有法防止 ...

请问老师，抗体的非特异性结合是结合细胞的什么位置了啊，一直以为就是结合FC受体呢

niwanmao

120971944 发表于 2016-7-5 08:42
请问老师，抗体的非特异性结合是结合细胞的什么位置了啊，一直以为就是结合FC受体呢 ...

这问题难倒我了：）
我觉得状态好的细胞应该主要是Fc受体部位，而状态不好的细胞则可能由于粘附能力强，所以就不限部位了。