用流式细胞仪对芽孢计数，结果准确吗

实验猿 · 发表于 2016-7-18 09:40:23

芽孢大小为1~2um，用BD公司的FACSCalibur流式细胞仪计数，结果准确可靠吗？我用的是低速进样，每个稀释倍数计10万个细胞。求大神指导！

niwanmao · 发表于 2016-7-19 12:40:40

绝对计数还是相对计数？需要注意排除碎片，所以还是建议加核酸染料

实验猿 · 发表于 2016-7-19 14:56:13

绝对计数，我的芽孢是完整的，没有细胞碎片，用核酸染料染色后是不是结果更准确一些？我们这里没有校准微球，就是开机后直接上样测的。

实验猿 · 发表于 2016-7-19 14:56:59

niwanmao 发表于 2016-7-19 12:40
绝对计数还是相对计数？需要注意排除碎片，所以还是建议加核酸染料

倪老师，你好。我需要的是绝对计数结果，我的芽孢是完整的，没有细胞碎片，用核酸染料染色后是不是结果更准确一些？我们这里没有校准微球，就是开机后直接上样测的。

niwanmao · 发表于 2016-7-19 16:05:08

实验猿发表于 2016-7-19 14:56
倪老师，你好。我需要的是绝对计数结果，我的芽孢是完整的，没有细胞碎片，用核酸染料染色后是不是结果更 ...

核酸染料结果会更准确，因为不是说你的样本没有碎片就肯定不会有碎片信号，碎片是不可避免的，而有些电子噪音也是无法避免的。
绝对计数就需要加绝对计数微球。

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