flowjo处理293T细胞后，最左边出现的细胞是什么，求解答？

maomao

293T细胞上机后，处理结果时，正确的圈门，设置相应的荧光，在选用伪彩图时，问题细胞并看不到，但是换成等高图后，就很明显的看得到，具体看附图，望解释这些是什么细胞？是什么原因造成的？对结果的影响有多大干扰？如何去掉这些细胞？处理结果或是上机该做哪些改进？谢谢！

前项后项图

处理后的伪彩图

等高图和问题细胞

niwanmao

这种信号应该是很少的，可能是电子噪音或者液路中的污染物信号

maomao

niwanmao 发表于 2016-11-2 15:42
这种信号应该是很少的，可能是电子噪音或者液路中的污染物信号

倪老师，这种信号在我这大部分都存在，包括T细胞也存在同样的问题？像频繁出现这种情况，电子噪音或污物信号还是这个原因吗？包括不同流式仪的结果，也会出现。

maomao

niwanmao 发表于 2016-11-2 15:42
这种信号应该是很少的，可能是电子噪音或者液路中的污染物信号

这种信号对结果的影响大吗？

niwanmao

maomao 发表于 2016-11-2 16:10
这种信号对结果的影响大吗？

因为你设门的时候，肯定会用某个特异性标记去圈，所以基本上可以去光，少量干扰也不会影响的。

maomao

niwanmao 发表于 2016-11-2 16:55
因为你设门的时候，肯定会用某个特异性标记去圈，所以基本上可以去光，少量干扰也不会影响的。 ...

倪老师，没有特异性标记圈门，根据的是目的细胞群的位置来圈门，所以大部分都存在这种干扰信号，我需要怎么处理，来去掉这种干扰信号？

niwanmao

maomao 发表于 2016-11-2 17:01
倪老师，没有特异性标记圈门，根据的是目的细胞群的位置来圈门，所以大部分都存在这种干扰信号，我需要怎 ...

你要圈目的细胞群，肯定有设门抗体啊，所以用设门抗体是可以排除掉这些信号的。

maomao

niwanmao 发表于 2016-11-2 18:03
你要圈目的细胞群，肯定有设门抗体啊，所以用设门抗体是可以排除掉这些信号的。 ...

倪老师，真没有用专门设门的抗体。做的细胞是单一细胞群，比如说293T细胞，就是单一的这种细胞，所以流式上机很明显，只有这个细胞群，圈门就很方便呀，后选择需要检测的孵育相应抗体的荧光信号，得出所谓的”阳性率“，如最初的三张图。所以照这样还是不能去掉这种信号。

niwanmao

maomao 发表于 2016-11-3 09:28
倪老师，真没有用专门设门的抗体。做的细胞是单一细胞群，比如说293T细胞，就是单一的这种细胞，所以流式 ...

通过反设门，看看这类信号分布在哪个位置，是否能单独排除掉，如果实在排除不掉，就不用管它了，因为比例确实低。

maomao

niwanmao 发表于 2016-11-3 19:36
通过反设门，看看这类信号分布在哪个位置，是否能单独排除掉，如果实在排除不掉，就不用管它了，因为比例 ...

好的，谢谢老师