关于CD11b+髓系细胞的流式分选

PECO2016

各位老师，大家好
        课题是从外周血中分选出CD11b+细胞的；最近用100微升抗凝血加抗体5微升，然后裂解，上流式后检测阳性率7%左右；但是第二天用1ml抗凝血10ml裂解液裂解，后加抗体，流式检测基本不表达；同一个样本，操作也很简单，不知为什么突然不表达了；
        求教各位老师解答帮助!!   谢谢谢谢

niwanmao

第一天就有问题吧，正常人外周血粒细胞比例很高的7％怎么样都像没染上的样子。你把图放上来看看。

PECO2016

倪老师，这是两天的图片      谢谢您

PECO2016

这种情况可能是什么原因呢

PECO2016

抗体未染上都是什么原因呢

PECO2016

niwanmao 发表于 2016-11-3 19:34
第一天就有问题吧，正常人外周血粒细胞比例很高的7％怎么样都像没染上的样子。你把图放上来看看。 ...

抗体未染上都是什么原因呢

niwanmao

PECO2016 发表于 2016-11-3 20:49
抗体未染上都是什么原因呢

1、抗体问题。
2、如果抗体没问题，需考虑加人AB型血清事先封闭。

PECO2016

niwanmao 发表于 2016-11-3 21:05
1、抗体问题。
2、如果抗体没问题，需考虑加人AB型血清事先封闭。

如果抗体污染了，还有什么补救的方法吗

niwanmao

PECO2016 发表于 2016-11-4 17:46
如果抗体污染了，还有什么补救的方法吗

抗体被什么东西污染？不会的。抗体如果之前有效，后来无效，大多和保存不当有关。如果一开始就无效，那么就可能跟产品有关。