凋亡实验结果结果很古怪请大家帮助分析

zhouweiwei

实验步骤：
1、六孔板接种细胞，每孔4*10五次方。
2、给药24h。
3、使用2.5%的胰酶（不含EDTA）0.5ml消化细胞，大概40s到1min，然后使用2ml的含血清的培养基停止消化。一孔一孔消化。因为在显微镜下观察发现还有细胞附着在六孔板上，所以使用培养基内反复吹打大概30-40下。
4、水平离心机离心455g，8min。
5、弃上清，使用冰浴的PBS洗了一次，再次离心450g，8min。
6、使用100微升的binding-buffer重悬细胞，随后加入AV-FITC和PI各5微升。
7、避光孵育15min。
8、上机。结果如图。
因为实验很着急，请大家多提一些意见，谢谢！！！空白组消化的有点急，比别的孔消化的厉害一些。可能是空白组阳性高的原因。结果中可以看到FITC阴性PI阳性和剂量呈依赖关系。

niwanmao

你为什么FSC和SSC用Log模式？应该用LIN模式才对，你用Log模式看不出选择的细胞对不对

zhouweiwei

niwanmao 发表于 2016-11-8 19:53
你为什么FSC和SSC用Log模式？应该用LIN模式才对，你用Log模式看不出选择的细胞对不对 ...

老师，FSC-SSC选择细胞的时候仅仅选择活细胞么？

niwanmao

zhouweiwei 发表于 2016-11-8 21:11
老师，FSC-SSC选择细胞的时候仅仅选择活细胞么？

用于选择正确的细胞群，你用LOG参数之后，如果未设置阈值，有时候是一些细胞碎片都说不定。

zhouweiwei

niwanmao 发表于 2016-11-8 21:52
用于选择正确的细胞群，你用LOG参数之后，如果未设置阈值，有时候是一些细胞碎片都说不定。 ...

老师您看我这样设门对么？

niwanmao

zhouweiwei 发表于 2016-11-9 23:00
老师您看我这样设门对么？

可以。