为什么我的PBS也有荧光

yanlinsun

本人新人一枚，学习做流式，求大神帮忙看看为什么我的PBS也有荧光，SYTO9和PI单染色的位置也不对呀

niwanmao

这是碎片信号和电子噪音，可通过设置阈值排除

yanlinsun

niwanmao 发表于 2016-11-21 18:43
这是碎片信号和电子噪音，可通过设置阈值排除

噢噢噢 ，谢谢倪老师，这个荧光强度这么强，我设置阈值去除噪音后，测的酵母菌的荧光强度也很强是怎么回事呢

niwanmao

yanlinsun 发表于 2016-11-22 11:32
噢噢噢 ，谢谢倪老师，这个荧光强度这么强，我设置阈值去除噪音后，测的酵母菌的荧光强度也很强是怎么回 ...

去除噪音以后的图我看看。

yanlinsun

这是用PI做的单染 ，位置应该在左上啊 可能机子用的时间太长吧，不太精准了

niwanmao

yanlinsun 发表于 2016-11-23 09:34
这是用PI做的单染 ，位置应该在左上啊 可能机子用的时间太长吧，不太精准了 ...

这个PI没有阳性吧？

yanlinsun

niwanmao 发表于 2016-11-23 18:11
这个PI没有阳性吧？

这是对加热杀死的酵母菌进行的PI染色

yanlinsun

这是分别做的SYTO9单染的 和PI+SYTO9双染，没有调补偿，是不是得调补偿啊，不太懂怎么调，而且也不会分析，请倪老师赐教

yanlinsun

yanlinsun 发表于 2016-11-24 09:14
这是对加热杀死的酵母菌进行的PI染色

我主要是想通过SYTO9+PI双染来检测细胞膜的通透率 ，但是第一次做流式，什么都不懂，望见谅。。。。

niwanmao

yanlinsun 发表于 2016-11-24 09:41
这是分别做的SYTO9单染的 和PI+SYTO9双染，没有调补偿，是不是得调补偿啊，不太懂怎么调，而且也不会分析， ...

从这两幅图对比看，我觉得补偿调好之后，PI应该染上的比例很低。