细胞没有分群但与阴性比峰向右偏移是怎么回事？

re6014

我这样画图对不对？这样的结果能不能理解成样品的CD4阳性率为24.4%（29.7%-5.3%=24.4%），这样的结果应该怎么解释？还有一点比表困惑，我用的是直接荧光标记法，染色后上机前要把荧光染料洗掉吗？

niwanmao

淋巴细胞的CD4分群很清楚的，象你这个样子，总体感觉是要么细胞不是淋巴细胞，要么抗体有问题。

re6014

niwanmao 发表于 2016-12-16 19:59
淋巴细胞的CD4分群很清楚的，象你这个样子，总体感觉是要么细胞不是淋巴细胞，要么抗体有问题。 ...

我这个确实不是淋巴细胞。这种结果我能不能理解成有24.4%的CD4阳性细胞呢？

niwanmao

re6014 发表于 2016-12-20 09:11
我这个确实不是淋巴细胞。这种结果我能不能理解成有24.4%的CD4阳性细胞呢？ ...

你的阴性对照是指什么？

re6014

niwanmao 发表于 2016-12-20 09:48
你的阴性对照是指什么？

就是没加荧光抗体的细胞（PBS代替荧光抗体）

niwanmao

re6014 发表于 2016-12-20 13:00
就是没加荧光抗体的细胞（PBS代替荧光抗体）

那不行的，你所说的阴性对照实际上是空白对照，而非真正的阴性对照。

如果你非要这么做，那么两个样本（空白对照和实验管）均需要加入Fc Block，阻断一下非特异性结合背景。

re6014

niwanmao 发表于 2016-12-20 14:02
那不行的，你所说的阴性对照实际上是空白对照，而非真正的阴性对照。

如果你非要这么做，那么两个样本（ ...

谢谢倪老师的回复。因为实验室条件有限，没有经费买同型对照，也没有FC block。所以就我这个结果而言，很有可能是荧光抗体的非特异性结合吗？
这个FC block只有用商品化的吗，能不能用BAS封闭？

niwanmao

re6014 发表于 2016-12-20 14:31
谢谢倪老师的回复。因为实验室条件有限，没有经费买同型对照，也没有FC block。所以就我这个结果而言，很 ...

很可能是非特异性结合。
阻断方法有几种，参考：http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-5510-1-1.html