细胞周期检测时，可否用2倍体的位置代替G2期细胞

cneagle

老师们好：

我想检测某一细胞周期的细胞表达某个蛋白，可否用这样一个简便的方法：如图所示，两个gate的细胞正好对应细胞周期的G1峰和G2峰，这样的话，如果我再用另外一个荧光抗体染色细胞，用散点图看看两个gate中这个蛋白染色情况，是否可以？

niwanmao

当然可以，只是对染色操作会要求比较高，细胞可能不能用乙醇固定了。

cneagle

niwanmao 发表于 2017-4-8 13:12
当然可以，只是对染色操作会要求比较高，细胞可能不能用乙醇固定了。

谢谢，我的细胞是用乙醇固定的。曾经试着圈了门，前一个峰大致相当于G1期细胞，后一个峰大致相当于G2期，只是这里面没有办法区分S期和M期，也没有看到有类似做法的文献。niwanmao老师，不知道这样的做出来的结果可靠不？有没有相应的文献推荐一下，谢谢！

niwanmao

cneagle 发表于 2017-4-10 08:02
谢谢，我的细胞是用乙醇固定的。曾经试着圈了门，前一个峰大致相当于G1期细胞，后一个峰大致相当于G2期， ...

G1和G2之间就是S期啊，可以用Modfit软件拟合出来的。
但是要把G2期和M期区分开，就不能单纯用PI了，而是需要结合组蛋白和Ki67等，参考：http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-2809-1-1.html

然而，这得不再次提醒，用乙醇固定过，其它标记基本上都标不上去，所以需要购买商品化细胞周期试剂盒，而且是非乙醇固定的那种。

cneagle

niwanmao老师好，多谢您的回复。我把流式散点图发上来，你看看。从这两个图上，结合modfit软件，可以大致圈到G1期，也可圈到G2（或者是G2M）期细胞，如果我再用另外一个CD分子（比如CD4），然后利用散点图这样大致圈到的G1、G2期细胞，观察CD4的阳性细胞数，是否可以？