请问小鼠免疫后测脾细胞中的Th1/Th2/Th17，需要跑多少个event？

saureus · 发表于 2017-4-14 10:32:57

请问倪老师小鼠免疫后测脾细胞中的Th1/Th2/Th17，需要跑多少个event？分离脾细胞---抗原刺激6天----PMA等刺激6h-12h----染色上机

BD的说明书上说2-3万个CD4阳性event

谢谢

小憨 · 发表于 2017-4-14 10:32:58

一般目的细胞大概在5000个就能出比较漂亮的流式图了，比如检测的细胞（打个比方，Treg好了）只占1%，你需要收50万个event，如果占50%，那1万个event就够了。因为event的显示数目可以通过流式分析软件调整，所以一般都是多收一些比较保险。

niwanmao · 发表于 2017-4-14 11:32:32

BD说明书这个要求也足够用了。这三类细胞比例还算可以的。

saureus · 发表于 2017-4-14 16:02:40

niwanmao 发表于 2017-4-14 11:32
BD说明书这个要求也足够用了。这三类细胞比例还算可以的。

我一共就跑了10000个！！

saureus · 发表于 2017-4-14 16:48:33

niwanmao 发表于 2017-4-14 11:32
BD说明书这个要求也足够用了。这三类细胞比例还算可以的。

倪老师检测不同样品中间是不是得洗一下吸头？

niwanmao · 发表于 2017-4-14 19:07:52

saureus 发表于 2017-4-14 16:48
倪老师检测不同样品中间是不是得洗一下吸头？

一般机器在不同样本之后都会有自动反冲的动作，不需要特地去洗涤的。

saureus · 发表于 2017-4-15 07:13:35

多谢二位老师的经验分享！

ghqiu09 · 发表于 2017-5-19 08:57:10

不知道你是什么机器，不过应该不管什么机器，都可以设置终止条件的，你可以设置Th1（你要设置这个门）...等细胞数达到一定量时终止啊，比如2000（2000貌似是最低要求）

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