BD C6检测凋亡怎么做补偿啊

zyfreely

       最近在用BD C6检测细胞凋亡，用的是Annexin V-FITC/PI双染法。但是不知道怎么在BD C6上做荧光补偿，昨天自己根据培训手册做了下补偿，不知道做的对不对，还请大神们多多指教下。
      1、PI单染管：单阳性群在竖向，调整其左上限（UL）的中值使其和左下限（LL）的中值一致，记下FL-1（FITC）通道减去的荧光百分比a
      2、FITC单染管：单阳性群在横向，调整其右下限（LR）的中值使其和左下限（LL）的中值一致，记下FL-3（PI）通道减去的荧光百分比b
      3、PI-FITC双染管：在FL-1（FITC）通道减去荧光百分比a，在FL-3（PI）通道减去荧光百分比b。完成补偿；结果如下图

不知道这个做法对不对，我是在BD C6上操作的，根据其培训手册自己摸索的，可能有些细节没注意到。另外按照这个做法岂不是不需要空白样了；或者说空白样是用来调电压的，但是我不知道怎么调电压（T-T），好像BD C6电压调不了吧。。。。。

家的感觉

个人认为：
1、C6确实是没法调节电压，一般的流式细胞仪要用空白细胞调一下FSC-SSC及荧光电压
2、利用PI单染管调节FL1-%FL3的补偿，如第一个图
3、利用FITC单染管调节FL3-%FL1的补偿，如第二个图
4、样本结果可适当调整补偿值，使每个象限的细胞群处在合适的位置

zyfreely

家的感觉 发表于 2017-4-19 15:05
个人认为：
1、C6确实是没法调节电压，一般的流式细胞仪要用空白细胞调一下FSC-SSC及荧光电压
2、利用PI单 ...

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