补偿微球

zj8237277

请问，为何要用补偿微球调补偿？ 可以把阳阴性区分那么明显，跟调补偿有什么关系？  谢谢！

niwanmao

补偿微球其实也只是做到初步调节，了解补偿值的大致范围，最后还是要根据正式的样本进行微调。
把阴性群和阳性群区分开，才能调节补偿，这是补偿原理决定的，因为需要计算阳性群MFI和阴性群MFI。

zj8237277

好的，非常感谢！
另外，我再想请教一个有关补偿的问题： 为何采用多激发激发可以减少荧光重叠？ 如比不用488去同时激发FITC,PE，而是选用488去激发FITC，561去激PE。  细胞上都同时染上FITC，PE了，你选择上不同的激发器也没用啊，细胞通过的时候，488不是还是一样会同时去检测FITC，PE嘛？

niwanmao

zj8237277 发表于 2017-6-25 21:16
好的，非常感谢！
另外，我再想请教一个有关补偿的问题： 为何采用多激发激发可以减少荧光重叠？ 如比不用4 ...

488是激发光，不是检测器。
用不同激发光，他们走的光路不同，不会交叉。

zj8237277

谢谢，表达错了，
如比不用488去同时激发FITC,PE，而是选用488去激发FITC，561去激PE。  细胞上都同时染上FITC，PE了，你选择上不同的激发器也没用啊，细胞通过的时候，488会同时激发FITC，PE，488所对应的检测器也还是一样会同时去收集FITC，PE啊

niwanmao

zj8237277 发表于 2017-6-27 10:11
谢谢，表达错了，
如比不用488去同时激发FITC,PE，而是选用488去激发FITC，561去激PE。  细胞上都同时染上F ...

你考虑的是少见的多个激发波长的荧光素，这种情况下，FITC可能会有PE漏过去，但是PE的检测通过你就不会有FITC荧光漏过去，不就是减少了荧光渗漏的概率了吗

zj8237277

谢谢！
明白，虽然FITC可能会有PE漏过去，但从发射光谱图上可以看出，PE漏到FITC的光很少。