为何单核细胞数量少？补偿怎么调？

小珊阿拗 · 发表于 2017-7-3 10:15:29

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老师，我这是C57小鼠脾脏去红后，用IFN-γ刺激后培养72小时后流式上机。以SSC为纵轴，FSC为横轴设门，门1为总细胞，门2为单个核细胞，门2的单个核细胞中CD11b+为单核细胞。以CD11b-PE为纵轴，以Ly6C-FITC为横轴，根据Ly6C-FITC 表达量将其分为Ly6Clow，Ly6Cmid，Ly6Chi三个单核细胞亚群。可我发现单核细胞很少，没法区分亚群。补偿调剂也有问题，找不到cd11b的阳性峰。老师帮我看看是哪里出了问题。

niwanmao · 发表于 2017-7-3 19:41:25

1、建议染一个死活鉴别染料，可以用低浓度PI。
2、建议染抗体之前，预先进行Fc阻断，详见站内相关资料（搜索“阻断”）

小珊阿拗 · 发表于 2017-7-4 13:08:14

本帖最后由小珊阿拗于 2017-7-4 13:12 编辑

niwanmao 发表于 2017-7-3 19:41
1、建议染一个死活鉴别染料，可以用低浓度PI。
2、建议染抗体之前，预先进行Fc阻断，详见站内相关资料（搜 ...

谢谢老师的回复。老师，如果我PE的抗体是大鼠抗小鼠的，那我Fc阻断如果用鼠血清的话，我是用大鼠血清还是小鼠血清？阻断有时间要求吗？

niwanmao · 发表于 2017-7-5 09:56:44

小珊阿拗发表于 2017-7-4 13:08
谢谢老师的回复。老师，如果我PE的抗体是大鼠抗小鼠的，那我Fc阻断如果用鼠血清的话，我是用大鼠血清还是 ...

小鼠血清。

zhengshengjing · 发表于 2021-1-15 12:18:05

倪老师您好。人外周血PBMC染色，同时分析淋巴细胞和单核细胞，在相同电压下，是否需要对淋巴细胞和单核细胞分别调补偿？谢谢。

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