流式配色基础求助

Shura · 发表于 2017-7-31 15:11:13

实验小白，想了解下流式配色的基础，看到这个地方有点不大明白，这里的共表达是一个什么样的含义？仅仅是同时表达么？还是说他们的表达量变化也是相关的？谢谢

niwanmao · 发表于 2017-7-31 15:11:14

Shura 发表于 2017-8-1 08:49
谢谢老师回答，但我还是有个地方不是很明白，以naive treg CD3+CD4+CD25+CD127-CD45Ra+举例，那这里面CD3 ...

尽量不要有补偿是方便判断是真正的共表达，还是因为补偿未调节到位造成的假的共表达。但实际上，只要补偿调节正确，没关系的。

niwanmao · 发表于 2017-7-31 21:18:45

指的是同时表达。

Shura · 发表于 2017-8-1 08:49:40

niwanmao 发表于 2017-7-31 21:18
指的是同时表达。

谢谢老师回答，但我还是有个地方不是很明白，以naive treg CD3+CD4+CD25+CD127-CD45Ra+举例，那这里面CD3 CD4 CD25 CD127都算是共表达了是么？如果我想就这个来配色，这里面的都尽量不要有补偿是么？

2007phoenix · 发表于 2017-8-1 09:16:26

Shura 发表于 2017-8-1 08:49
谢谢老师回答，但我还是有个地方不是很明白，以naive treg CD3+CD4+CD25+CD127-CD45Ra+举例，那这里面CD3 ...

你举例的这个目的细胞CD3 CD4 CD25 算共表达，CD127不表达；
配色时需要考虑荧光素的搭配，流式细胞仪的类型及荧光光谱，抗体结合荧光素的荧光强度，抗原表达的强度等因素，一般高表达的抗原用弱的荧光素标记，低表达的抗原用强的荧光素标记。荧光素发出的光谱会有光谱重叠，需要通过补偿调节去除其他荧光信号对该荧光素的干扰。

Shura · 发表于 2017-8-1 11:46:23

2007phoenix 发表于 2017-8-1 09:16
你举例的这个目的细胞CD3 CD4 CD25 算共表达，CD127不表达；
配色时需要考虑荧光素的搭配，流式细胞仪的 ...

嗯说错了 CD45Ra 因为看到这个资料上面写的不要共表达但是在实际配色的过程中补偿的调节是难以避免的觉得有些矛盾

Minions · 发表于 2017-8-2 00:03:38

其实在流式配色问题上，CD分子是否在细胞上共表达不是主要考虑的问题，主要的问题是你在一条流式管里你想检测什么分子，其中的每子则会标上不同的流式荧光！流式荧光与表达分子的搭配，按照“强-弱搭配”的原则！

Shura · 发表于 2017-8-7 14:37:12

Minions 发表于 2017-8-2 00:03
其实在流式配色问题上，CD分子是否在细胞上共表达不是主要考虑的问题，主要的问题是你在一条流式管里你想检 ...

十分感谢

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