阳性细胞群荧光强度不明显可以算是阳性吗？

wlting

这个是我跑的流式图，目的是利用所制备的抗体用于流式检测淋巴细胞表面的marker分子。对比有加抗体和没加抗体的结果，有加抗体的阳性比没加抗体的荧光强度更强，但是没能出现明显的两群细胞，且百分比含量也不高。所以我想请问大家，我的抗体对于流式检测有效吗?这样的阳性能算是阳性吗？

wlting

@niwanmao 倪老师，求救啊~

niwanmao

1、做什么指标？
2、淋巴细胞特异性标记，例如CD3有没有染？如果没有，不排除这个门内是碎片的可能性。

wlting

做的是正常个体有该marker分子的细胞比例，这个没有用CD3染，因为是鱼细胞，买不到CD3分子的抗体。

niwanmao

wlting 发表于 2017-8-27 17:08
做的是正常个体有该marker分子的细胞比例，这个没有用CD3染，因为是鱼细胞，买不到CD3分子的抗体。 ...

你可能课题保密不能公布该分子的名称，所以我也无法判断你这个分子的表达是否正常。
鱼的淋巴细胞确实偏小，这个区域可能是对了，至于这个分子，如果你确实不能公开，那么可以自己查询一下相关文献，参考其它人做的。

我想成大牛

wlting 发表于 2017-8-27 17:08
做的是正常个体有该marker分子的细胞比例，这个没有用CD3染，因为是鱼细胞，买不到CD3分子的抗体。 ...

那你怎么确定这是你的目标亚群呢？因为human的全血经常做，所以一般是知道每种细胞亚群大概位置的，你圈的这个要是细胞碎片怎么办，因为细胞碎片通常也是一团聚集在左下角的。

wlting

niwanmao 发表于 2017-8-28 08:42
你可能课题保密不能公布该分子的名称，所以我也无法判断你这个分子的表达是否正常。
鱼的淋巴细胞确实偏 ...

区域是对的，因为有参考文献。但是该分子因为没有其他人做过，所以不知道正常个体的百分比是多少，且机体免疫后变化也不明显，所以现在有点纠结。

wlting

我想成大牛 发表于 2017-8-28 08:45
那你怎么确定这是你的目标亚群呢？因为human的全血经常做，所以一般是知道每种细胞亚群大概位置的，你圈 ...

这个不是细胞碎片，确定是我的目的细胞群。我有参考文献，谢谢。

niwanmao

wlting 发表于 2017-8-28 09:23
区域是对的，因为有参考文献。但是该分子因为没有其他人做过，所以不知道正常个体的百分比是多少，且机体 ...

别人没做过这个分子，只能你自己做个几十例正常个体，大致了解范围了。

wlting

niwanmao 发表于 2017-8-28 10:30
别人没做过这个分子，只能你自己做个几十例正常个体，大致了解范围了。 ...

嗯，现在在增加样本数量，实验重复再重复。