在钙流检测的时候Fluo-4 AM的时间问题

lgfffancy

Fluo-4 AM进入细胞后脱去AM酯，与细胞内游离钙结合，我想请问一下一般加入Fluo-4 AM需要多久才能上机检测？

niwanmao

lgfffancy 发表于 2017-9-10 11:49
对的，那我要看加入药物刺激后的动态变化，加入Fluo-3 AM后，30分钟后洗涤，然后上机2分钟，然后加入药物 ...

是的，详细步骤见下面这篇文章：
https://flowcyto.cn/bbs/forum.php?mod=attachment&aid=MTMxNTV8OTNkODRjMjV8MTczNTIxNTQ3MHwwfA%3D%3D

niwanmao

Fluo-4 AM我不太清楚，Fluo-3 AM是加入后，30度或37度孵育30分钟，然后洗涤上机，参见：http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-115-1-1.html

如果要观察动态变化，加入染料后，混合均匀，直接上机，低速获取，最后在Time参数图上会显示出荧光的变化，你就会知道什么时间点是最强的，以后做实验就有数了。

lgfffancy

niwanmao 发表于 2017-9-7 08:40
Fluo-4 AM我不太清楚，Fluo-3 AM是加入后，30度或37度孵育30分钟，然后洗涤上机，参见：http://www.flowcyt ...

对的，那我要看加入药物刺激后的动态变化，加入Fluo-3 AM后，30分钟后洗涤，然后上机2分钟，然后加入药物，然后持续监测，这个过程对吗？