上样前细胞处理

1060990080 · 发表于 2017-9-11 09:33:26

请问各位大侠：由于时间关系，晚上10点左右从脾脏组织提取到的原代淋巴细胞可以用PBS悬浮、在四度冰箱过夜，第二天再加抗体孵育上流式吗？？这过程需要注意点什么呢？？？

niwanmao · 发表于 2017-9-11 11:19:45

用细胞保存液最好。

也可以自己配制1％多聚甲醛，但需要事先验证固定对检测的抗原无影响。

ghqiu09 · 发表于 2017-9-12 09:14:20

如果只是表面标记的话，其实还是做完了固定比较好，我偷懒，一般是室温20分钟就够了

1060990080 · 发表于 2017-9-12 22:09:28

ghqiu09 发表于 2017-9-12 09:14
如果只是表面标记的话，其实还是做完了固定比较好，我偷懒，一般是室温20分钟就够了 ...

意思是抗体孵育完之后可以留第二天再上流式吗（算起来得要放置十个小时左右哦~~）

1060990080 · 发表于 2017-9-12 22:09:55

niwanmao 发表于 2017-9-11 11:19
用细胞保存液最好。

也可以自己配制1％多聚甲醛，但需要事先验证固定对检测的抗原无影响。 ...

倪老师~~细胞保存液还有活动吗？

niwanmao · 发表于 2017-9-13 08:02:48

1060990080 发表于 2017-9-12 22:09
倪老师~~细胞保存液还有活动吗？

有。但需要你自己去找、去猜

ghqiu09 · 发表于 2017-9-13 08:32:06

1060990080 发表于 2017-9-12 22:09
意思是抗体孵育完之后可以留第二天再上流式吗（算起来得要放置十个小时左右哦~~） ...

可以啊，用多聚甲醛固定后一般认为在一周内上机都没问题

1060990080 · 发表于 2017-9-16 09:49:44

niwanmao 发表于 2017-9-13 08:02
有。但需要你自己去找、去猜

这

倪老师，你太调皮了~~

1060990080 · 发表于 2017-9-16 09:50:24

ghqiu09 发表于 2017-9-13 08:32
可以啊，用多聚甲醛固定后一般认为在一周内上机都没问题

请问你有具体的操作流程吗？参考一下呢~~

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