麻烦老师帮忙看下流式细胞仪检测凋亡结果

linhai52086 · 发表于 2017-9-26 23:41:20

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老师好！
我用的染料是 Annexin-V FITC 和PI
分别做了药物干预24小时和48小时细胞检测凋亡
但是早晚凋都几乎没有趋势，不过左上角（AV-PI+）死亡细胞的比例会随着药物浓度的增加而增加，左下角(AV-PI-)活细胞的比例会随着药物浓度的增加而降低，可以帮我解释一下吗，多谢老师了！

niwanmao · 发表于 2017-9-27 07:49:20

应该是设门没设好，看左侧绿色的这堆细胞，就感觉是一些碎片或非特异性信号。
你传一个文件上来，我做个示范看看。

linhai52086 · 发表于 2017-9-27 11:37:34

请倪老师帮忙看下圈门情况感谢

niwanmao · 发表于 2017-9-27 12:24:16

linhai52086 发表于 2017-9-27 11:37
请倪老师帮忙看下圈门情况感谢

FSC和SSC设门是对的，然后你要把上面所有分析的图形的Gate都设置为P1，你目前的图形都是显示All Events

linhai52086 · 发表于 2017-9-27 21:24:46

niwanmao 发表于 2017-9-27 12:24
FSC和SSC设门是对的，然后你要把上面所有分析的图形的Gate都设置为P1，你目前的图形都是显示All Events ...

好的老师我试试

648669086 · 发表于 2017-10-7 17:04:57

补偿过了，Q1-RL压了一群细胞。500nM药物那个图明显看得出，要适当调整下。

happyeday · 发表于 2017-10-13 09:17:52

niwanmao 发表于 2017-9-27 12:24
FSC和SSC设门是对的，然后你要把上面所有分析的图形的Gate都设置为P1，你目前的图形都是显示All Events ...

倪老师好，他的这个实验500浓度时，P1门里的细胞才33.47%，可能是因为浓度大，很多细胞已经死亡，出了P1门。做凋亡实验，这个门是否应该再扩大一些？把这些原本该在P1门的细胞圈进去呢？谢谢您！

niwanmao · 发表于 2017-10-13 17:54:12

happyeday 发表于 2017-10-13 09:17
倪老师好，他的这个实验500浓度时，P1门里的细胞才33.47%，可能是因为浓度大，很多细胞已经死亡，出了P1 ...

你可以把上面压轴的信号调下来看看是不是同一类细胞，如果是同一类，可以圈进去。

happyeday · 发表于 2017-10-16 20:48:20

niwanmao 发表于 2017-10-13 17:54
你可以把上面压轴的信号调下来看看是不是同一类细胞，如果是同一类，可以圈进去。 ...

谢谢倪老师。

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