原代细胞诱导培养结果很难重复

holmes27

我们是用脐血分离干细胞体外诱导培养，因为个体差异和每次诱导条件细胞状态、流式检测等各方面的细微差别，导致最后结果百分比和MFI每次数据都相差很大，很难做统计学分析，请问各位有没有遇到过这样的情况？可不可以用同一批细胞（同一个人的）设置重复实验？还是必须要不同个体的才能说明问题？

niwanmao

holmes27 发表于 2017-10-9 01:26
加不同干预，检测细胞的活化情况。

按照你的描述，你的指标都没分群，用MFI评估变异很大。
如果相同处理的样本，批次之间差异大，并且能排除掉处理因素变异，那么也不能排除机器CV大的原因。用MFI来评估的话，对各类条件的要求更为严格。只有把机器、处理等变异都控制在一定范围，才能做出正确的结果。

niwanmao

实验目的是希望说明什么问题呢？

648669086

这个可以，做科研在写论文的时候你就只能是技术重复。像你这种情况由于细胞不稳定通常要求是要做生物重复。可以选择品系稳定，临床指标一致的SPF级实验动物进行试验。做实验诱导条件必须保持一致。

holmes27

niwanmao 发表于 2017-10-7 10:55
实验目的是希望说明什么问题呢？

加不同干预，检测细胞的活化情况。

holmes27

648669086 发表于 2017-10-7 17:14
这个可以，做科研在写论文的时候你就只能是技术重复。像你这种情况由于细胞不稳定通常要求是要做生物重复。 ...

谢谢您的回复！可能是个体差异比较大，做了生物学重复就更大了。。。而且检测指标都是中低表达的没有分群，只能看MFI，又多了一个不稳定因素。看来这是做人实验必须要过的一关。