T细胞感染

菜鸟

我们最近在构建新的car-t，包装慢病毒然后感染T细胞，结果发现慢病毒能够感染293T细胞，计算出的病毒滴度也很高，能够达到10的8次方，但是用慢病毒感染T细胞检测感染率却不能用流式细胞仪检测到感染率，有一点点偏移，不分群。想问问大家有没有遇到过这种情况，怎么解决的？

niwanmao

你的意思是转染后，293T分群好，T细胞分群不好，是吧？
这个说明转染的慢病毒没有问题，检测方法也不应该有问题，而应该是转染效率问题才对吧。

菜鸟

niwanmao 发表于 2017-10-9 13:56
你的意思是转染后，293T分群好，T细胞分群不好，是吧？
这个说明转染的慢病毒没有问题，检测方法也不应该有 ...

我们用同样的感染方法感染T细胞，T细胞感染率都很高，且细胞分群很好；T细胞没有感染率是针对这次新构建的质粒。

还想再问一下你有什么推荐的慢病毒感染T细胞的方法吗？

niwanmao

菜鸟 发表于 2017-10-9 16:18
我们用同样的感染方法感染T细胞，T细胞感染率都很高，且细胞分群很好；T细胞没有感染率是针对这次新构建 ...

我没有实际操作过这方面，只能从看到过的原理上进行推测，会不会是因为你的T细胞这次没有充分活化？这点在转染上应该还是很关键的。

具体的方法，我相信你肯定比我厉害，另外推荐一篇较好的Protocol，供参考：https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/19110622