细胞凋亡图 不理解

Helen_ztt

frozenflying 发表于 2017-10-21 10:41
我也是新手，之前咨询的BD的技术支持，她建议可以用水浴60度，高温加速坏死是已知的，所以可以有阳性结果 ...

H2O2诱导的凋亡我们做的总是跟活细胞的信号分不开，很苦恼，就像这样

frozenflying

Helen_ztt 发表于 2017-10-21 13:13
H2O2诱导的凋亡我们做的总是跟活细胞的信号分不开，很苦恼，就像这样

你的浓度和时间多少？The Prodrug Plain-A: Simultaneous Release of Cisplatin and Aspirin，这篇文章里面的H2O2的凋亡结果很好的，你可以参考一下

Helen_ztt

frozenflying 发表于 2017-10-21 14:06
你的浓度和时间多少？The Prodrug Plain-A: Simultaneous Release of Cisplatin and Aspirin，这篇文章里 ...

好的，谢谢！我们200uM最长到过72h。

frozenflying

Helen_ztt 发表于 2017-10-21 15:05
好的，谢谢！我们200uM最长到过72h。

这篇文章用的是1mM，45min

niwanmao

可能你的药物存在较明显的自发荧光吧，从图上看，这种药物应该是没有诱导凋亡。

frozenflying

niwanmao 发表于 2017-10-21 16:10
可能你的药物存在较明显的自发荧光吧，从图上看，这种药物应该是没有诱导凋亡。 ...

谢谢倪老师！
倪老师，自发荧光我没有考虑到，我去测测看。
不过我从空白里面细胞的状态判断，细胞应该已经发生了死亡，细胞质变得更加透明，细胞开始皱缩，细胞皱缩是比较明显的现象，并且在12h的时候已经有很多的细胞飘了。
老师，您判断没有凋亡是由于没有明显的凋亡分群是吧？

niwanmao

frozenflying 发表于 2017-10-21 16:25
谢谢倪老师！
倪老师，自发荧光我没有考虑到，我去测测看。
不过我从空白里面细胞的状态判断，细胞应该已 ...

实体组织细胞的话，这样的结果有点不太对劲，不知道样本的FSC/SSC散点图如何？

frozenflying

niwanmao 发表于 2017-10-22 14:34
实体组织细胞的话，这样的结果有点不太对劲，不知道样本的FSC/SSC散点图如何？ ...

倪老师，这是我的图，空白组和凋亡的阳性组，分群挺明显的，十字门我是根据AV、PI、KB组和凋亡阳性组综合画的，然后做到OXA和我的药物组里面的时候，就会发生我的药物组一群细胞跨越两个象限的情况，不是对角线跨越就是左右跨越，这个看起来就不合理。

                               
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niwanmao

frozenflying 发表于 2017-10-22 15:36
倪老师，这是我的图，空白组和凋亡的阳性组，分群挺明显的，十字门我是根据AV、PI、KB组和凋亡阳性组综合 ...

FSC和SSC均要用LIN格式，可以看得清楚一点，FSC/SSC散点图上，我觉得旁边的凋亡细胞要圈进去，你的结果可能会好看一点。

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