电压设置

鑫鑫点灯灯

各位老师，这是我测的外周血T淋巴细胞亚群。下图中：上面的图为“图二”，下面的图为“图一”
1. 请看图一的第一行第一个图（FSC-SSC），感觉很奇怪，三群细胞没有很好的分开，圈淋巴细胞后对其进行CD45，CD3，CD4，CD8的分析数据根本不正确，为什么？
2. 换种分析方式：图二第一行第二个图（CD45-SSC），能分开三群细胞，但三群细胞左侧的一列细胞是什么？
3. 用第二种分析方式圈的淋巴细胞包含于第一种分析方式圈的淋巴细胞里，那第一种分析方式圈的淋巴细胞门里面是哪些东西，如何使之与淋巴细胞分开？

我是用的BD FACSCan to,电压自己调的：FSC 120V；SSC 330V.
本人接触流式不久，望各位老师指导下。谢谢。

niwanmao

1、因为红细胞和碎片多，所以导致FSC/SSC散点图淋巴细胞附近出现大量CD45－的信号。因此，淋巴细胞亚群分析为什么建议大家用CD45设门就是这个原因。
2、CD45/SSC中CD45－的细胞就是红细胞和碎片，需排除掉。
3、建议先用CD45/FSC散点图，排除掉CD45－FSC小的红细胞和碎片，再进行正常的淋巴亚群分析。

鑫鑫点灯灯

谢谢！倪老师