倪老师,您好,我今天做flow发现一个非常奇怪的问题,同一批做的脑组织的样本,同样染CD3 FITC; CD19 BUV395; CD4 APC 和 CD8 BUV510 以及其他5种表面marker, 但是8个样本中只有其中的一个可以见到明显的T细胞和B细胞的分群,其他的7个只能分出CD3阴性和阳性两群,而在CD3 阳性的T 细胞里,这7个样本也不能在CD4和CD8的两个marker 中分群。( 附图 分别为 可以分群的脑1(T&Bcell),脑1(CD4,CD8 Tcell), 不能分群的脑2( B& Tcell),第二排是脑2(CD4&CD8) ,以及两个血样品的分群。 这8个样本都是我亲自同时处理的,使用的是同时配好的同一管抗体,设门前排除了死细胞(只用了FSC-w和SSC-w)和粘连体,补偿调节似乎也没太大问题,同时为了证实抗体是好用的,我还同时染了血和脾,都可以清晰的分群。 我之前从没有遇到过这么奇怪的现象,请问为什么同一批染色会出现这么大差异?非常感谢!
脑1
脑1
脑2
脑2
血
血
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