细胞内抗原标记

otoizz

我们之前用triton X100 自配破膜剂 做共聚焦显示了抗原强阳性。但是我们用同样的方法和抗体做流式检测却和阴性对照没有区别。是流式一定得用市售的内染试剂盒吗？应该没有这么大区别吧？

niwanmao

你做共聚焦的时候，应该细胞事先固定在玻片上了吧。那时，Triton的破膜效果是非常好，而且细胞能继续保持完整。
而做流式的时候，在悬液中，细胞如果固定效果不够好，或者未经固定，或者Triton浓度过高，都很容易导致细胞碎裂，从而得到一些非特异性信号，所以你会观察到无差异。

如果有可能，还是推荐用商品化的，毕竟条件优化过。