小鼠肺组织的流式结果异常

quinn0926

尊敬的版主，最近我在做小鼠肺组织的流式，出现了问题解决不了，希望得到帮助。 小鼠肺组织用美天旎的gentleMACS研磨，搭配美天旎肺解离试剂盒，制成单细胞悬液，裂红后染抗体，4°30分钟。 目的是检测肺上皮细胞、内皮细胞和间质细胞的百分比。 根据文献先圈出CD45- 7-AAD-细胞群，其中肺上皮细胞是CD326+（EpCAM），内皮细胞是CD144+（VE-cadherin），间质细胞是CD326-CD144-。 我的问题是CD144+和CD326+的细胞不能分群，出现了双阳细胞，无法解释。重复了几次都是这样，请人调补偿也不能分群。有人说是没有Fc受体封闭的原因，但是我想上皮细胞上应该没有Fc受体吧。麻烦倪老师，您给看看，是什么原因，万分感谢。 附上我的数据数据，有点大，分开上传。

niwanmao

看了下数据，感觉首先要排除一下CD144抗体的问题。